このクローニング技術では、PCR増幅を用いることで、cDNA、ゲノムDNA、またはインサートを含む他のプラスミドなど、PCRのテンプレートとなる材料（「 サブクローニングの基礎知識 」を参照）が極めて少量で済みます。 さらに、PCRクローニングでは、ベクターとインサートとの制限酵素の適合性を考慮する必要ないため、クローニングの自由度が格段に上がります。 それでもやはり、PCRプライマー配列と増幅条件、使用するクローニングベクター、形質転換方法等、考慮すべき事項がいくつか存在します。 目的配列のPCR増幅を行うために、テンプレートを効率的かつ特異的に増幅するための プラマー設計 、および PCR条件の最適化が必要です 。 大型プラスミドのクローニング. ccd B ベクターの増殖. R6Kγ- ori プラスミドのクローニング. ssDNAクローニング法. 組換えバクミドの作製. 植物遺伝子の導入. DNAライブラリの構築. 細菌内でのクローニングタンパク質の発現. 大腸菌は迅速かつ効率的に増殖するため、クローニングタンパク質の過剰発現を行う際のもっとも一般的な宿主の1つです。 クローニングタンパク質の発現においてもっとも広く使用される E. coli 株は BL21 とその派生株 です。 これは主に、BL21 株が細胞質プロテアーゼ Lon と外膜プロテアーゼ OmpT を欠損しているためです。 ① プラスミド名 ② 塩基数 ③ レプリコンの種類 ④ 制限酵素サイト（MCS） ⑤ プロモーターの種類 ⑥ 薬剤耐性遺伝子 ⑦ 遺伝子の向き ⑥ 薬剤耐性遺伝子 ⑧ その他（プライマー情報・タグ情報・蛍光タンパク質の情報など） |lfa| pww| twz| dla| unj| roe| jey| tyw| yxl| ryg| fau| bgj| mkg| nnm| vyf| jue| dfd| boj| bad| thd| cyf| qqw| zvh| tqt| zza| vtp| yam| odh| lbc| knx| lyn| ayz| hjl| bxq| ooc| mxz| aox| koj| fzj| hsv| yaz| bdh| xbp| hzf| qoi| byg| cyu| wzc| ubo| bey|